Микроскопия изображений на основе длительности флуоресценции (FLIM)
Микроскопия изображений на основе длительности флуоресценции (FLIM) .
Существуют различные методы микроскопии изображений на основе продолжительности флуоресценции, предлагаемые для целей как широкопольной, так и конфокальной микроскопии. В частности таким методом является режим счета одиночных фотонов с корреляцией во времени ( TCSPC). Флуорохром переходит в возбужденное состояние под действием лазерного импульса, излучаемого импульсным лазерным диодом или фемптосекундным лазером. Фотоумножитель для счета фотонов и
ли лавинный диод для счета одиночных фотонов регистрирует фотоны, регистрирует фотоны, которые излучает флуорофор. Измеряется временной интервал между лазерным импульсом и моментом регистрации фотона. Данные о фотонах в связи с относительным временем между лазерным импульсом и регистрацией сигнала суммируются в гистограмме. Каждый пиксель изображения FLIM включает информацию о полной кривой затухания флуоресценции. Если изображение состоит из трех флуорохромов с разным временем жизни, распределение всех красителей передается тремя различными цветами.